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孔雀石綠是一種帶有金屬光澤的綠色結(jié)晶體，又名堿性綠、嚴(yán)基塊綠、孔雀綠，其既是殺真菌劑，又是染料，易溶于水，溶液呈藍(lán)綠色。長期以來，漁民都用它來預(yù)防魚的水霉病、鰓霉病、小瓜蟲病等，而且為了使鱗受損的魚延長生命，在運(yùn)輸過程中和存放池內(nèi)，也常使用孔雀石綠。研究顯示，孔雀石綠在魚內(nèi)殘留時(shí)間很長，且其具有高性、高殘留和致癌、致畸、致突變等副作用，鑒于此，許多國家均將孔雀石綠列為水產(chǎn)養(yǎng)殖禁用藥物。

【檢測原理】

孔雀石綠快速檢測卡是采用免疫競爭法分析原理結(jié)合膠體金標(biāo)記技術(shù)設(shè)計(jì)的一種快速檢測試劑，適用于水產(chǎn)品中孔雀石綠的檢測。  

樣本溶液滴入檢測卡的加樣孔后，樣本溶液中的藥物與金標(biāo)抗體相結(jié)合，從而阻止金標(biāo)抗體與纖維素膜上藥物偶聯(lián)物結(jié)合。當(dāng)樣本溶液中的藥物含量大于檢測限時(shí)檢測線不顯色，結(jié)果為陽性；當(dāng)樣本溶液中藥物含量小于檢測限時(shí)檢測線顯紫紅色，結(jié)果為陰性。

【檢測靈敏度】

孔雀石綠靈敏度為1ppb。

【樣品處理】

1、取切碎的一定量的去脂肪組織樣本，用均質(zhì)機(jī)均質(zhì)；

2、稱取5 g均質(zhì)物于50 ml離心管中；

3、向上述50ml管中加入提取劑1溶液3ml，提取劑2溶液1 ml ，然后加入5 ml乙腈，再加入一包提取劑3，蓋上蓋子劇烈振蕩2 min后，室溫下4000 rpm離心5 min；

4、移取7 ml上清液于15 ml離心管中，加入二氯甲烷4ml后，蓋上蓋子顛倒混勻10秒鐘，室溫下4000 rpm離心2 min，棄上清液，移取下層有機(jī)相5ml于5 ml 離心管中，加入50μL催化劑，60μL氧化劑，顛倒混勻10秒，于6 0℃環(huán)境下，利用氮?dú)饣蚩諝獯蹈伞?/span>

5、向吹干的離心管中加入0.3 ml MG復(fù)溶液，和正己烷0.5 ml，于室溫下4000 rpm離心1 min，用移液器移取下層75μl溶液，待檢。

【操作步驟】

1、從檢測卡袋中取出所需的檢測卡，放置室溫復(fù)溫，在卡上做好樣品編號標(biāo)記。

2、用一次性取樣滴頭吸取樣品，滴入加樣孔3滴（75ul），在加液過程中勿使液體溢出加樣孔。

3、5-10分鐘內(nèi)觀察結(jié)果，15分鐘后的結(jié)果無效。

【儲存條件】

1、在4-30℃陰涼避光干燥處儲存，忌冷凍。

2、在4-30℃下的環(huán)境溫度操作。

3、有效期見包裝盒側(cè)面。

4、保存期間應(yīng)避免光照、潮濕和過熱。檢測卡保質(zhì)期為12個(gè)月。

5、檢測線T出現(xiàn)，產(chǎn)品失效。

【注意事項(xiàng)】

1、過期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品，均不可使用。

2、打開的檢測卡應(yīng)盡快使用以免受潮后失效。

3、不要觸摸檢測卡中央的白色膜面。

4、取液滴管不可混用，以免交叉污染。

5、待檢樣品溶液需清亮、無混濁顆粒、無細(xì)菌污染，否則容易導(dǎo)致阻塞、顯色不明顯等異常現(xiàn)象，從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定。

【結(jié)果判讀】

陰性（-）：測試區(qū)（T）和質(zhì)控區(qū)（C）均出現(xiàn)紅色條帶，判定為陰性。

陽性（+）：僅質(zhì)控區(qū)（C）出現(xiàn)一條紅色條帶，判定為陽性。

無效：質(zhì)控區(qū)（C）未出現(xiàn)紅色條帶，建議重做。